Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации




НазваниеПриказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации
страница1/12
Дата публикации22.07.2013
Размер1.34 Mb.
ТипДокументы
www.zadocs.ru > Медицина > Документы
  1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   12
ПРИКАЗ МИНЗДРАВА РФ ОТ 26.03.2001 N 87 О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА


МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПРИКАЗ

26 марта 2001 г.

N 87

О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА

Эпидемиологическая ситуация с заболеваемостью сифилисом

остается крайне напряженной. С начала 90-х годов она возросла

почти в 40 раз и в 1999 г. достигла 186,7 случаев на 100 тыс.

населения.

Серьезность ситуации усугубляется тем, что сифилис, как и

другие инфекции, передаваемые половым путем, способствует

распространению ВИЧ - инфекции.

Одним из основных мероприятий, направленных на предупреждение

дальнейшего распространения заболеваемости сифилисом, является его

ранняя диагностика.

Однако материально - техническая база серологических

лабораторий не соответствует потребностям учреждений

здравоохранения. За последние десять лет число кожно -

венерологических диспансеров, не имеющих в своем составе

серологических лабораторий, возросло с 25,3% в 1989 г. до 31,2% в

1999 г.

С целью совершенствования лабораторной диагностики сифилиса,

повышения качества работы и обеспечения единства подхода по ее

организации:

ПРИКАЗЫВАЮ:

1. Утвердить:

1.1. Методические указания "Постановка отборочных и

диагностических тестов на сифилис" (приложение N 1).

1.2. Методические указания "Расчетные нормы времени проведения

лабораторных исследований при диагностике сифилиса методом реакции

пассивной гемагглютинации" (приложение N 2)

2. Директору Центрального научно - исследовательского кожно -

венерологического института Минздрава России А.А.Кубановой,

директору Уральского научно - исследовательского института

дермато - венерологии и иммунопатологии Минздрава России

Н.В.Кунгурову, директору Нижегородского научно -

исследовательского кожно - венерологического института Минздрава

России Н.К.Никулину:

2.1. Обеспечить организационно - методическое руководство по

внедрению диагностических тестов в субъектах Российской Федерации

в соответствии с приложениями N 1 и N 2.

2.2. До 01.06.2001 подготовить и представить в установленном

порядке необходимые материалы на аккредитацию серологических

лабораторий научно - исследовательских институтов в качестве

экспертных в здравоохранении.

2.3. Обеспечить проведение внешнего контроля качества

лабораторной диагностики сифилиса.

3. Руководителям органов управления здравоохранением субъектов

Российской Федерации:

3.1. Организовать работу по серологической диагностике

сифилиса в соответствии с приложениями N 1, N 2.

3.2. Принять неотложные меры по развитию и укреплению

материально - технической базы серологических лабораторий, обратив

особое внимание на организацию таких лабораторий в составе кожно -

венерологических диспансеров.

4. Считать не действующим на территории Российской Федерации

приказ Министерства здравоохранения СССР от 2 сентября 1985 г.

N 1161 "О совершенствовании серологической диагностики сифилиса".

5. Контроль за исполнением настоящего приказа возложить на

Первого заместителя Министра А.И.Вялкова.

Министр

Ю.Л.ШЕВЧЕНКО

Приложение N 1

Утверждено приказом

Минздрава России

от 26.03.2001 г. N 87

^ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПОСТАНОВКА ОТБОРОЧНЫХ И ДИАГНОСТИЧЕСКИХ

ТЕСТОВ НА СИФИЛИС

Аннотация

Методические указания предназначены для лабораторных

работников и клиницистов дерматовенерологической службы России.

Указания посвящены современным методам серо- и ликвородиагностики

сифилиса, широко апробированным в научно - исследовательских и

лечебно - профилактических учреждениях страны. Представлены новые

высоко чувствительные специфичные методики постановки реакций на

сифилис. Освещено предназначение различных тестов в качестве

отборочных, диагностических и контрольных для оценки эффективности

лечения. Описаны принципы реакций, методики их постановки,

материально - техническое обеспечение, источники получения

ошибочных результатов и мероприятия по технике безопасности при

работе с инфекционным материалом.

Организация - разработчик: ГУ ЦНИКВИ МЗ РФ.

Авторы: докт. биол. наук, проф. Г.А.Дмитриев, докт. мед. наук,

проф. В.Н.Беднова, докт. мед. наук Г.Ф.Тимченко, канд. мед. наук

Г.А.Киселева, канд. мед. наук Т.И.Милонова, канд. мед. наук

О.А.Стоянова, З.П.Акопова.

Введение

Для серо- и ликвородиагностики сифилиса в России могут

применяться следующие методы:

1. Микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном (МР),

которая является отборочным тестом при обследовании населения на

сифилис. Постановка МР осуществляется с плазмой или

инактивированной сывороткой крови. Зарубежные тесты ВДРЛ (VDRL),

РПР (RPR) и другие аналогичные МР как по принципу постановки

реакции, так и по чувствительности и специфичности.

2. Иммуноферментный анализ (ИФА). Антиген из культуральных или

патогенных бледных трепонем.

3. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Антиген из

культуральных или патогенных бледных трепонем.

4. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) в следующих модификациях:

РИФ-абс, РИФ-ц, РИФ с капиллярной кровью из пальца. Антиген -

патогенная бледная трепонема штамма Никольса.

5. Комплекс серологических реакций на сифилис (КСР), состоящий

из реакции связывания комплемента (РСК) с трепонемным и

кардиолипиновым антигенами, и МР. Поскольку трепонемный антиген

является специфическим, КСР относится к диагностическим тестам. В

связи с разработкой более чувствительных, специфичных и менее

трудоемких реакций стало возможным заменить при постановке КСР

реакцию связывания комплемента на ИФА или РПГА также в сочетании с

МР.

6. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ), в которой в

качестве антигена используют патогенные бледные трепонемы штамма

Никольса.

РИТ, РИФ, ИФА и РПГА являются высокочувствительными и

высокоспецифичными реакциями на сифилис. Они относятся к

диагностическим подтверждающим тестам. При этом в связи с

простотой постановки и наличием коммерческих тест - систем ИФА и

РПГА могут быть и высокоэффективными отборочными тестами.

Ввиду различной чувствительности при разных формах сифилиса,

специфичности и сложности постановки каждая из указанных реакций

имеет свое предназначение.

Профилактическое обследование населения на сифилис можно

проводить с помощью МР, КСР, ИФА и РПГА. Все организационные

вопросы по применению данных реакций с этой целью решаются

органами здравоохранения на местах в зависимости от местных

условий и возможностей.

При получении положительного результата в МР пациент должен

обследоваться дерматовенерологом с повторным исследованием крови в

любом диагностическом тесте на сифилис.

При профилактическом обследовании на сифилис больных глазных,

психоневрологических, кардиологических стационаров, беременных, в

частности, направляемых на искусственное прерывание беременности,

должны использоваться КСР, ИФА или РПГА.

При обследовании доноров необходимо применять КСР или ИФА или

РПГА, но обязательно в сочетании с МР. Постановка двух реакций

одновременно обусловлена высокой ответственностью данного

исследования.

МР в количественном варианте с экономической точки зрения

необходимо использовать в качестве контроля эффективности лечения,

заменив ею количественную постановку РСК с кардиолипиновым

антигеном.

Вышеуказанные специфические тесты служат для диагностики всех

форм сифилиса, в частности, скрытого, а также для распознавания

ложноположительных результатов, полученных в МР и КСР. При

диагностике скрытого сифилиса целесообразна постановка двух

специфических тестов одновременно.

Поскольку ИФА и РПГА являются более высокочувствительными,

специфическими и воспроизводимыми тест - системами, которые можно

использовать в качестве отборочных и подтверждающих тестов,

осуществить до 2006 г. замену комплекса серореакций (КСР)

вышеуказанными реакциями при диагностике сифилиса.

Таким образом, последовательность обследования пациентов на

сифилис представляется следующим образом:

- при первичном обследовании производится постановка

отборочной (скрининговой) реакции микропреципитации (РМП) или ее

модификации (RPR- РПР, TRUST - ТРАСТ, VDRL - ВДРЛ) в

количественном и качественном вариантах и в случае положительного

результата - любого специфического подтверждающего трепонемного

теста (РПГА, ИФА, КСР, РИФ, РИТ);

- после окончания терапии ставится РМП или ее модификация и по

снижению титра судят о динамике инфекционного процесса и

эффективности терапии. Подтверждением эффективности проведенной

терапии считается снижение титра в 4 и более раз в течение 1 года;

- по окончании этого срока осуществляется постановка той же

специфической реакции, что и при первичном обследовании. Следует

учитывать, что специфические трепонемные тесты могут оставаться

положительными (не негативировать) в течение ряда лет, а в

отдельных случаях остаются положительными на всю жизнь.

Методика постановки и суть различных модификаций МР, ИФА,

РПГА, РИФ, РСК и РИТ подробно описаны в настоящих Методических

указаниях.

Формула метода

Впервые детально описаны 6 методов, используемых для серо- и

ликвородиагностики сифилиса включающих 15 модификаций.

Рекомендована замена РСК при определении эффективности лечения

сифилиса МР, что дает экономический эффект. Введена в инструкцию

количественная методика постановки РИТ, расширяющая возможности

поздних форм сифилиса. Включены методики постановки РСК, РИТ,

РИФ-ц и ИФА для ликвородиагностики сифилиса.

Показания к применению метода

Серо- и ликвородиагностика всех форм сифилиса.

Противопоказаний нет.

^ МИКРОРЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ С КАРДИОЛИПИНОВЫМ АНТИГЕНОМ

(ЭКСПРЕСС - МЕТОД)

Принцип. При добавлении к плазме или сыворотке крови больного

сифилисом эмульсии кардиолипинового антигена образуется преципитат

(комплекс антиген - антитело), выпадающий в виде хлопьев белого

цвета.

Материально - техническое обеспечение метода

Оборудование для взятия крови и постановки МР:

- капиллярные пипетки аппарата Панченкова;

- градуированные пипетки 1, 2, 5 и 10 мл;

- автоматические пипетки на 20-200 мкл;

- наконечники для автоматических пипеток;

- пробирки длиной 8-10 см и 14-15см, диаметром 1-1,5 см или

центрифужные;

- пластинки из прозрачного материала с лунками диаметром 1-1,2

см, глубиной не менее 0,5 см;

- иглы для взятия крови из пальца и вены; шприцы;

- центрифуга, дающая не менее 1000 об/мин;

- аппарат для встряхивания;

- стерилизатор для кипячения игл, шприцов, инструментов.

Ингредиенты для МР:

- антиген кардиолипиновый для микрореакции;

- холин - хлорид (включается в упаковку с антигеном);

- натрий хлорид х.ч.;

- натрий лимоннокислый (цитрат натрия)трехзамещенный

Na C H O 5H O;

3 6 5 7 2

- мертиолат C H O S Na Hg.

9 9 2

Растворы:

- изотонический раствор натрия хлорида 0,9%;

- 10% раствор холин - хлорида готовится следующим

образом: к 29,65 мл изотонического раствора натрия

хлорида добавляют 0,35 мл 0,01% раствора мертиолата

и 5 мл 70% раствора холин - хлорида. Смесь тщательно

перемешивают. При отсутствии мертиолата для

приготовления 10% раствора холин - хлорида

необходимо к 30 мл стерильного изотонического

раствора натрия хлорида добавить 5 мл 70% раствора

холин - хлорида;

- 5% раствор трехзамещенного цитрата натрия

готовится на дистиллированной воде и фильтруется.

Раствор не стоек. При помутнении его надо заменять

свежим. Хранится в холодильнике при 4 град. в

течение 5-6 дней.

Контрольные лиофилизированные сыворотки крови необходимы для

установления пригодности эмульсии антигена. Отрицательную и

положительную контрольные сыворотки крови используют

неразведенными, слабоположительную получают из положительной путем

ее разведения по титру, установленному в день приготовления

эмульсии антигена. При отсутствии лиофилизированных сывороток

крови используют нативную положительную или смесь положительных в

РСК с кардиолипиновым антигеном или микрореакции инактивированных

сывороток крови, которые разливают по 0,5 мл в пробирки с плотно

закрывающимися пробками, хранят в морозильном отделении

холодильника, используют с титром выше 1:8. В день постановки

реакции сыворотку крови титруют на пластинке с целью подтверждения

ранее установленного титра, для контроля качества эмульсии и

получения слабоположительного результата, который используют затем

в течение рабочего дня.

Титрование контрольной сыворотки проводят следующим образом: в

9 лунок пластинки, начиная со второй лунки, вносят по 90 мкл

изотонического раствора натрия хлорида и добавляют в первую и

вторую лунки по 90 мкл контрольной сыворотки крови. Содержимое

второй лунки перемешивают пипеткой, насасывая и выпуская его в

лунку 5-6 раз. Затем набирают 90 мкл содержимого второй лунки в

пипетку и 90 мкл переносят в третью лунку. Содержимое третьей

лунки перемешивают таким же образом и переносят в четвертую лунку

и так далее до последней лунки. Из последней лунки 90 мкл удаляют.

Во все лунки добавляют по 30 мкл эмульсии кардиолипинового

антигена. Пластинку встряхивают в аппарате в течение 5 минут,

добавляют по 90 мкл изотонического раствора натрия хлорида и

оставляют при комнатной температуре на 5 минут, после чего

регистрируют результаты. Разведение сыворотки крови, давшее

слабоположительный результат (+/ 2+), используют в качестве

слабоположительного контроля. Для получения его делают

соответствующее разведение. Например, если слабоположительный

результат получен с разведением сыворотки крови 1:8, то для

получения контрольной слабоположительной сыворотки крови в

пробирку вносят 0,7 мл изотонического раствора натрия хлорида и

0,1 мл положительной сыворотки крови, перемешивают.

При правильно проведенном титровании положительной сыворотки

крови по мере ее разведения наблюдается равномерное уменьшение

величины хлопьев преципитата.

При снижении реактивности хранящейся нативной контрольной
  1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   12

Добавить документ в свой блог или на сайт

Похожие:

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconМинистерство российской федерации по делам гражданской обороны
В целях реализации Указа Президента Российской Федерации от 9 ноября 2001 г. №13091 “О совершенствовании государственного управления...

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconПеречень противопоказаний к донорству крови и ее компонентов
Федерации от 14 сентября 2001 г. №364 «Об утверждении порядка медицинского обследования донора крови и ее компонентов» и Приказ Минздравсоцразвития...

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconПеречень противопоказаний к донорству крови и ее компонентов
Федерации от 14 сентября 2001 г. №364 «Об утверждении порядка медицинского обследования донора крови и ее компонентов» и Приказ Минздравсоцразвития...

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconПриказ от 26 марта 1999 г n 100 о совершенствовании организации скорой...
О совершенствовании организации скорой медицинской помощи населению российской федерации

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconПриказ от 19 декабря 2011 г. N 1571н об утверждении административного...
Административный регламент Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по предоставлению государственной...

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconМинистерство транспорта российской федерации приказ
Положения о Министерстве транспорта Российской Федерации, утвержденного Постановлением Правительства Российской Федерации от 30 июля...

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconПриказ Министерства здравоохранения и социального развития РФ от 1 июня 2010 г. N 409н
Основ законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан от 22 июля 1993 г. N 5487-1 (Ведомости Съезда народных депутатов...

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconМинистерство транспорта российской федерации приказ
Утвердить прилагаемые Правила технической эксплуатации железных дорог Российской Федерации

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconМинистерство транспорта российской федерации приказ
Утвердить прилагаемые Правила технической эксплуатации железных дорог Российской Федерации

Приказ минздрава РФ от 26. 03. 2001 n 87 о совершенствовании серологической диагностики сифилиса министерство здравоохранения российской федерации iconМинистерство внутренних дел российской федерации приказ
Российской Федерации" и от 11 ноября 2005 г. N 679 "О порядке разработки и утверждения административных регламентов исполнения государственных...

Вы можете разместить ссылку на наш сайт:
Школьные материалы


При копировании материала укажите ссылку © 2013
контакты
www.zadocs.ru
Главная страница

Разработка сайта — Веб студия Адаманов